Mestre Panda

Dificuldade: díficil

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Numa aula de Biologia e Geologia, os alunos realizaram uma experiência para extrair DNA de fruta. O protocolo de extração de DNA envolve lise celular com libertação de todo o material intracelular e purificação do DNA. Com a lise celular são libertados para a solução todos os compostos intracelulares: proteínas, lípidos, polissacáridos, ácidos nucleicos, moléculas orgânicas de baixo peso molecular e iões. O rompimento mecânico ocorre por meio da pressão exercida sobre o material biológico. Utiliza-se ainda um detergente, para completar a lise celular, e sal (NaCl), cujos catiões neutralizam as cargas negativas das moléculas de DNA, o que permite a sua visualização. O processo de extração do DNA implica também a utilização de proteases (enzimas hidrolíticas) e de etanol a frio, uma vez que o DNA é insolúvel neste solvente.

Nesta experiência, foi utilizado o protocolo seguinte:

Cortar o fruto (cerca de 50 g), em pedaços pequenos, para dentro de um almofariz e macerar bem.
Deitar num copo 100 mL de água quente (60 °C), adicionar 3 g de sal (NaCl) e 10 mL de detergente da loiça. Mexer bem.
Juntar o fruto esmagado à solução anterior e mexer lentamente, durante alguns minutos.
Colocar um filtro de papel num funil e coar a mistura anterior para um tubo de ensaio.
Adicionar ao líquido filtrado cerca de 25 mL de uma solução com proteases.
Adicionar etanol a 70% refrigerado (verter cuidadosamente o etanol pelas paredes do tubo de ensaio).
Observar a formação de uma fase alcoólica sobre uma fase aquosa.
Deixar repousar cerca de 5 minutos.
Observar a formação de filamentos esbranquiçados, correspondentes ao DNA

A Figura 2 representa os resultados obtidos.

Questão:

Identifique, de entre as afirmações relativas às etapas do procedimento de extração do DNA, as três afirmações que as justificam corretamente.

Escreva, na folha de respostas, os números selecionados.

Fonte: Exame Biologia e Geologia - 2025, Época Especial - Grupo 2 Exercício 1

Resumos

I. A utilização de detergente contribui para desnaturar as proteínas, libertando o DNA.

II. O etanol frio é essencial, pois permite a separação do DNA da solução aquosa.

III. A utilização de NaCl possibilita a agregação das moléculas de DNA.

IV. A separação dos filamentos de DNA resulta da sua maior densidade relativamente à fase alcoólica.

V. A trituração da fruta permite a rutura mecânica das paredes celulares, ajudando a libertar o DNA.

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